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恒奧德紫外可見分光光度計操作步驟原理波長范圍 190nm~1100nm
更新時間:2025-12-10
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恒奧德紫外可見分光光度計操作步驟原理波長范圍 190nm~1100nm
是一種基于物質對紫外和可見光區域(通常為200-800納米)輻射的選擇性吸收來進行定性和定量分析的儀器。?
核心原理
其基本原理是?朗伯-比爾定律?(Lambert-Beer Law),該定律指出:當一束單色光穿過溶液時,溶液的吸光度(A)與溶液的濃度(c)和液層厚度(b,即光程長度)成正比,數學關系為 A = εbc(其中ε為摩爾吸光系數)。?
吸光度A與透光率T的關系為 A = -log??(T)。?
物質分子吸收特定波長的光后,會發生電子能級躍遷,不同物質因其分子結構不同,具有特征吸收光譜,據此可進行定性分析;而通過測量特征波長處的吸光度大小,可實現定量分析。?
儀器主要部件
儀器通常由以下五部分組成:?
?光源?:提供連續光譜。紫外光區常用氘燈或氫燈(波長范圍約180-360納米),可見光區常用鎢燈或鹵鎢燈(波長范圍約350-1000納米)。?
?單色器?:將光源發出的復合光分解并分出所需波長的單色光,核心元件為棱鏡或光柵。?
?吸收池(比色皿)?:用于盛放待測溶液。可見光區可用玻璃池,紫外光區必須使用石英池,以避免吸收紫外光。?
?檢測器?:將透過溶液的光信號轉換為電信號,常用光電管、光電倍增管或二極管陣列檢測器。?
?信號處理器與顯示系統?:對檢測器輸出的信號進行放大、處理并顯示結果(如吸光度、透光率或吸收光譜圖)。?
基本操作步驟
雖然不同型號的儀器操作細節可能略有差異,但核心流程相似:?
?開機預熱?:接通電源,讓光源和檢測器穩定工作,通常需要預熱15-30分鐘。
?波長選擇?:通過儀器面板或軟件選擇所需的測量波長(例如,掃描整個波長范圍以獲取吸收光譜,或選擇特定波長進行定量分析)。?
?空白對照校準?:將裝有純溶劑(空白液)的吸收池放入光路,按“調零"或“參比"鍵,將此時的吸光度設為零點(即透光率為100%)。這是為了扣除溶劑等背景的吸收影響。?
?樣品測量?:將裝有待測溶液的吸收池放入光路,儀器直接顯示該溶液在指定波長下的吸光度或透光率。?
?數據記錄與分析?:記錄測量結果。對于定量分析,通常需要繪制標準曲線或使用對照品比較法